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干貨分享:低吸附移液器吸頭的耐化學性
移液的準確性和精確性不僅對吸頭與移液器是否匹配有要求,還需要適合液體的吸頭。當使用標準吸頭(PP)移取表面張力小的液體時容易在吸頭表面留下一層薄膜(如含有清潔劑的液體)。液體的殘留會導致移液結果的不精確、不一致,同時也損失了部分昂貴的樣品。在許多DNA和蛋白質的分析方法中所用到的試劑和樣品通常都含有清潔劑。研發(fā)低吸附吸頭就是為了改善液體殘留這個普遍的問題。
不同的廠商使用不同的技術來制造低吸附吸頭,因此其一致性、疏水程度、耐化學性方面各不相同。以下就各廠商的低吸附吸頭的耐化學性作比較。
材料
BUNSEN 標準吸頭:1000μ
BUNSEN 低吸附吸頭:1000μl
其他廠商低吸附吸頭:1000μl
電動移液器: 50-1000μl,以4檔速度吸液、1檔速度排液
化學試劑:異丙醇、乙腈、DMF(二甲基甲酰胺)、綠色食品染料
3個其他廠商的低吸附移液器吸頭
96 孔微孔板分光光度計 (Biotek)
吸光度測試
在吸光度測試中,我們使用染色試劑(溶解于蒸餾水中的綠色食品染料)來測定排液后移液器吸頭中殘余的液體。使用被測吸頭最大標稱體積來吸取綠色試劑。然后直接將該液體排回容器中。接下來以吸頭的最大容量使用蒸餾水漂洗吸頭5 次。然后使用分光光度計 (405 nm) 測定漂洗液的吸光度,并將結果與參考試劑進行對比。漂洗液的吸光度與吸頭中的液體殘留量直接相關。
耐化學性測試
1000 μl 溶劑:使用 1000 μl 移液器吸頭對異丙醇、乙腈和二甲基甲酰胺分別反復吸打 20 次。用蒸餾水將吸頭漂洗 3次。然后使用染色液體作為試劑,利用吸光度測試分析這種處理對低吸附吸頭性能的影響。每種溶劑對 6 個吸頭進行重復測試。將經(jīng)過化學處理的吸頭的結果與未經(jīng)處理的標準吸頭和低吸附吸頭進行結果對比。
BUNSEN低吸附移液器吸頭的耐化學性
多種技術被用于創(chuàng)建移液器吸頭的低吸附表面。穩(wěn)定的方法可生產(chǎn)出疏水且無浸出的吸頭。如圖 1 所示,被測的低吸附吸頭之間在耐化學性方面存在著顯著的差異。一些廠商的吸頭在使用選定溶劑進行處理后低吸附功能會顯著降低?;瘜W測試后 低吸附吸頭的性能與未經(jīng)任何化學處理時的性能處于相同水平,這表明這些吸頭是惰性的且無浸出。對 Sartorius 低吸附吸頭進行高壓滅菌也不會影響吸頭的性能(數(shù)據(jù)未顯示)。
低吸附吸頭與 標準吸頭和低吸附吸頭進行對比。根據(jù)吸光度測試方法使用 Sartorius Picus 電動移液器(1000 μl) 和 1000 μl 移液器吸頭進行耐化學性測試。對每個供應商的 6 個吸頭進行重復測試。
結論:
市場上的各種低吸附吸頭在耐化學性方面存在顯著的差異。低吸附吸頭具有最佳的耐化學性,確保低吸附性能不受到液體的影響且無浸出。
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